DNA Recombinante

O DNA Recombinante são moléculas de DNA que possuem fragmentos de DNA derivados de duas ou mais fontes, geralmente de espécies diferentes. A técnica central da metodologia do DNA recombinante é a clonagem molecular, que consiste na transferência de um gene de um organismo para outro, ou seja, a recombinação de DNA proveniente de diferentes fontes.

Para que o DNA recombinante seja originado é necessária a ação das enzimas de restrição. As enzimas de restrição são fundamentais para a manipulação do DNA. Denominadas de endonucleases de restrição. São enzimas bacteriana que reconhecem sequências de pares de bases específicas na molécula de DNA e as cortam nesses pontos.

              Fonte: https://trabalhosparaescola.com.br/dna-recombinante/formacao-do-dna-recombinante/

COMO É PRODUZIDO O DNA RECOMBINANTE?

O DNA recombinante baseia-se na técnica de clonagem, que permite fazer várias cópias idênticas de um pedaço específico de DNA. Para isso, é necessário realizar alguns passos: 

• Primeiramente é necessário isolar o fragmento de DNA de interesse;

• O fragmento de DNA é inserido em um vetor, que é uma molécula de DNA na qual um gene é inserido para construir a molécula de DNA recombinante. Os plasmídeos são usados como vetores para clonar fragmentos de DNA, pois são projetados para permitir inserção de um DNA exógeno, têm origens de replicação e são capazes de se replicar independentemente do cromossomo bacteriano. Assim, o fragmento do gene alvo se une ao vetor, através da DNA ligase, que é responsável por selar as lacunas do eixo do DNA, funcionando como uma cola. 

• A molécula de DNA recombinante produzida é introduzida em um organismo hospedeiro, podendo então ser replicadas. Esse processo é conhecido como transformação, no qual as células bacterianas captam o DNA do ambiente externo. As células hospedeiras copiam o DNA do vetor juntamente com o próprio DNA criando múltiplas cópias do DNA inserido. 

• O vetor possui um marcador selecionável que permite a identificação de moléculas recombinantes. Isso facilita para selecionar as células de interesse do vetor. Um marcador de antibiótico é usado, assim uma célula hospedeira sem o vetor morre quando exposta a um determinado antibiótico, enquanto o hospedeiro com o vetor sobrevive e se multiplica, porque é resistente. 

• Após as células com o plasmídeo recombinante serem identificados, elas podem crescer em grande escala, replicando o fragmento de DNA. Nesse momento, damos às bactérias um sinal químico que as instrui a produzir a proteína alvo. As bactérias servem como “mini fábricas”, produzindo grandes quantidades de proteína. A proteína de interesse é então purificada, separada dos demais conteúdos das células, por exemplo, outras proteínas e macromoléculas. Isso garante que não haja nenhuma impureza, restando apenas o produto final, como no caso da insulina. 

APLICAÇÃO DO DNA RECOMBINANTE

• Contribuição para estudos genômicos

• Transgênicos

• Produção de medicamentos e enzimas

• Criação de vacinas sintéticas

• Terapia Genética (Transferência de material genético para cura ou prevenção de alguma doença)

• Insulina 

Referências:

AUTOR DESCONHECIDO. Os princípios da clonagem molecular: DNA recombinante. Publicado em: 10 de Novembro de 2017. Disponível em: https://kasvi.com.br/clonagem-molecular-dna-recombinante/

MAGALHÃES, Lana. DNA Recombinante. Data de publicação desconhecida. Disponível em: https://www.todamateria.com.br/dna-recombinante/

AUTOR E DATA DE PUBLICAÇÃO DESCONHECIDOS. A Tecnologia do DNA Recombinante. Disponível em: https://www.sobiologia.com.br/conteudos/Biotecnologia/recombinante.php